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    吸脂術(shù)時(shí)用無菌針管從臀上方吸取深層脂肪組織20 mL. 在1 h內(nèi)將其移至離心管內(nèi)，加入等量PBS緩沖液，充分振蕩后低速離心800 r/min×10 min.

    反復(fù)沖洗3次后加入等量15 g/L I型膠原酶. 37℃水浴中充分振蕩30 min，再加入等量胎牛血清（FBS）中止. 低速離心10 min后棄去上清.

    將下層細(xì)胞用PBS懸浮后加入16 mmol/L NH4Cl 37℃水浴中10 min以裂解紅細(xì)胞. 低速離心10 min后再用PBS沖洗3次.

    最后將細(xì)胞用含100 mL/L FBS+10 g/L青霉素的DMEM懸浮后移入培養(yǎng)瓶中，37℃，50 mL/L CO2培養(yǎng)箱中孵育，48 h后首次換液，棄去懸浮細(xì)胞.

    隨后每3 d換液，1 wk后傳代. 將第3代細(xì)胞用于流式細(xì)胞儀檢測(cè). 濃集細(xì)胞到109/L后進(jìn)行流式細(xì)胞儀檢測(cè).

    細(xì)胞傳至第3代時(shí)將其以2×107/L的細(xì)胞數(shù)分別轉(zhuǎn)入各定向培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng). 誘導(dǎo)培養(yǎng)2 wk后，對(duì)成脂誘導(dǎo)組進(jìn)行油紅Ｏ脂肪顆粒染色，

另外：

現(xiàn)在脂肪干細(xì)胞缺乏特異的表面標(biāo)志鑒定，各類文獻(xiàn)提到脂肪干細(xì)胞表達(dá)陽性的標(biāo)志物有：cd13，cd29，cd59，cd49e，cd73，cd90，HLA-ABC等。但表達(dá)陽性不代表具有特異性，所以要從標(biāo)志物上鑒定脂肪干細(xì)胞還是很困難的，應(yīng)該說不具有很強(qiáng)的說服能力。

按文獻(xiàn)所說的步驟來提取脂肪干細(xì)胞，形態(tài)類似干細(xì)胞，并且具有多向分化的能力，這就足以說明提取的細(xì)胞是干細(xì)胞。你要是想證明你養(yǎng)的就是干細(xì)胞，最好的辦法筆者認(rèn)為還是做個(gè)多向誘導(dǎo)分化。

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